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PCR非特异性扩增出现的原因及对策

http://www.aweb.com.cn 2007年12月6日10:55 农博网
 

  

  现象:条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带

  原因:

  1.引物特异性差

  2.模板或引物浓度过高

  3.酶量过多

  4.Mg2+浓度偏高

  5.退火温度偏低

  6.循环次数过多

  对策:

  1.重新设计引物或者使用巢式PCR

  2.适当降低模板或引物浓度

  3.适当减少酶量

  4.降低镁离子浓度

  5.适当提高退火温度或使用二阶段温度法

  6.减少循环次数


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